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      在配置顆粒培養基過程中偶爾會出現不凝固一搖晃就破碎現象原因

      點擊次數:1830 發布時間:2022-05-12
        在微生物培養時經常會用到顆粒培養基,但是,在配制培養基過程中偶爾會出現不凝固、半凝固或者一搖晃培養基就破碎的現象,這是什么原因?
       
        大量文獻指出,瓊脂的凝固程度主要受到PH值和瓊脂含量的影響,PH值較低(≤4.0)時,PH值是影響凝固等級的主要因素;PH值較高(5.0~8.0)時,瓊脂濃度是影響凝固等級的主要因素。
       
        藥典上培養基配方中明確規定了PH值和瓊脂含量,如配制操作正常,凝固應是不會出現問題的。為此,我們針對培養基出現的凝固異常進行了分析及試驗:
       
        一、培養基PH值問題:培養基滅菌前后PH值有何變化?經查閱大量相關學術研究,不同培養基滅菌前后PH普遍有這樣的變化超勢:高壓滅菌前pH值4.5-8.0的培養基滅菌后pH值變化較小,偏酸性的略上升,偏堿性的略下降。但酸性或堿性較強的培養基滅菌前后PH值變化較大。因我們常使用的培養基pH值均在4.5-8.0范圍內,所以偶爾出現的培養基凝固不好應不是PH值影響的。
       
        二、瓊脂問題:瓊脂是培養基zui常用的凝固劑,是一種海藻多糖,PH在4-10之間才會形成凝膠,且其凝膠強度和瓊脂糖的濃度有關。目前我們實驗室使用的均是成熟配方的培養基,為什么會偶爾出現凝固不好的現象呢?
       
        在仔細核查了瓊脂粉的生產廠家、批號、保質期及配制時的稱量、溶解、定容和轉移等過程。排除了瓊脂粉質量問題,但發現培養基分裝準備高溫滅菌時,有部分經開水溶解的瓊脂呈細小顆粒狀沉在瓶底,即未*溶解,后查閱資料發現,瓊脂加熱至95℃時才開始溶解,說明我們用熱水溶解瓊脂時,瓊脂未能*溶解,這可能是導致培養基難凝固的原因。
       
        于是我們在配制顆粒培養基時,先將瓊脂煮沸5分鐘后再分裝、滅菌,后培養基冷卻至40℃時能*凝固。自瓊脂溶解方式改變后,便未再出現培養基不凝固、半凝固或者一搖晃培養基就破碎的現象。

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