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      干粉培養基在使用之前必須進行滅菌處理

      點擊次數:1370 發布時間:2022-03-15
         干粉培養基在使用之前必須進行滅菌處理,將其所含活菌全部殺死或全部除去。常用的滅菌方法有過濾除菌、干熱滅菌、濕熱滅菌及輻照滅菌等。

        其中,濕熱滅菌法又包括四種方式:煮沸法、流動蒸汽滅菌法、間歇滅菌法和壓力蒸汽滅菌法。通常來說,使用比較多的是壓力蒸汽滅菌法。

        但是對于有些培養基來說,高壓條件會損壞培養基中的某些成分,不利于培養基的使用,所以只能采用煮沸滅菌的處理方法。

        接下來主要就煮沸滅菌方法進行討論,話不多說一起看看吧。

        一、煮沸滅菌的常見表述

        有關煮沸滅菌的描述,通常有如下幾種方式:

        a、稱取本品41.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,煮沸不要超過2分鐘。無需高壓滅菌。臨用時制備,不得超過3小時。(參考VRBA培養基:點擊查看)

        b、稱取本品50.3g,加入1000ml蒸餾水中,加熱煮沸至*溶解,冷至45-50℃,搖勻,傾入無菌平皿備用。無需高壓滅菌。(參考BS培養基:點擊查看)

        c、稱取本品89g,煮沸溶解于1000ml蒸餾水中,冷至45-50℃時,傾入無菌平皿,備用。注:無需高壓滅菌。(參考TCBS培養基:點擊查看)

        d、稱取本品57g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,不要過分加熱,冷至50-55℃時,傾入無菌平皿,部分開蓋干燥2h,然后蓋上,備用。無需高壓滅菌。在 24小時內使用。(參考XLD培養基:點擊查看)

        這些方法描述中,都特別強調“無需高壓滅菌”、“不要過分加熱”、“煮沸充分溶解”,那么究竟該怎樣操作,才能達到既滅菌*又盡量降低對培養基的破壞呢?

        二、煮沸滅菌的實際操作

        1、關于煮沸方式,有人提出可以隔水煮沸,但經過反復試驗,發現這種煮沸方式存在兩大弊端:①溫度不夠,達不到滅菌效果;②經隔水煮沸的含瓊脂培養基,在水浴的過程中易出現分層現象。

        2、為了對培養基進行有效煮沸滅菌,根據我們實踐摸索,建議如下操作:

       ?、贉蕚浜秒姶艩t和搪瓷缸(不要用鐵質容器);

       ?、趯⑴囵B基按比例加水,稱量至搪瓷缸中,用玻璃棒不斷攪拌,直至*溶解、無明顯團狀物或顆粒;

       ?、蹖⑻麓筛字糜陔姶艩t上,大火燒開,期間持續攪拌,避免糊底;當液面*沸騰后,立即將搪瓷缸從電磁爐上拿開,算是一次煮沸操作;液面回落后,立即放回電磁爐,重復上面的步驟;總共煮沸3次即可。

       ?、軐⒅蠛玫呐囵B基冷卻至需要的溫度,進行傾注平皿等操作。

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